于生物學(xué)、醫學(xué)研究中,細胞固定是一種常用技術(shù),用于保存細胞結構以供顯微鏡觀(guān)察或其他分析。聚四氟乙烯全氟烷氧基樹(shù)脂〔PFA〕是一種高效固定劑,大量用途于流式細胞術(shù)、免疫熒光染色還有組織學(xué)行業(yè)。其固定原理主要涉及以下角度:
,PFA通過(guò)化學(xué)交聯(lián)作用實(shí)現細胞固定。PFA分子中甲醛基團能夠和細胞內蛋白質(zhì)、核酸、其他生物大分子有交聯(lián)反應,形成穩固共價(jià)鍵。這種交聯(lián)不僅增強了細胞結構穩固性,還減少了細胞內部成分降解,從而保持了細胞形態(tài)真實(shí)性、完整性。
PFA對細胞膜具有優(yōu)良滲透性。相比于其他固定劑,PFA可以更很好穿透細胞膜,到達細胞內部各個(gè)區域,包括細胞核、線(xiàn)粒體亞細胞結構。這使得PFA能夠全面固定細胞所有組成部分,避免因固定不均導致實(shí)驗誤差。
另外,PFA還具有較低毒性,操作安全性較高,且不會(huì )顯著(zhù)影響后續染色效果。其固定細胞適合進(jìn)行許多類(lèi)型染色實(shí)驗,如免疫熒光標記、原位雜交,為科研人員提供了極大便利。
上述概括起來(lái)PFA通過(guò)化學(xué)交聯(lián)、高滲透性實(shí)現細胞固定,是細胞生物學(xué)研究中無(wú)法替代很大工具。它于確保細胞結構穩固和此同時(shí),也為后續分析、檢測奠定了堅實(shí)基礎。
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